摘要:目的 探讨芹菜素(Apg)对2 型糖尿病(T2DM)模型KKAy 小鼠认知障碍的影响及其潜在机 制。方法 生信分析Apg 作用靶点基因、T2DM 及脑小血管病病变基因,取交集,将兴趣基因进行蛋白 质互作分析,DAVID 数据库进行基因本体(GO)功能和京都基因和基因组数据库(KEGG)富集分析。选 取10周龄SPF级自发性2型糖尿病KKAy小鼠,体重(36±3)g,KKAy小鼠分为4组:T2DM模型组(Model组, 10 只);低、中、高剂量Apg 干预组(Apg 腹腔注射,剂量分别为3、6、12 mg/kg,每组各10 只);10 只C57BL/J 小鼠作为空白对照组(Control 组)。采用水迷宫实验检测小鼠认知功能,在干预组中选取认知改善最 明显一组(Apg 组)进行后续rtPCR、炎性因子检测、Western-blot 实验。随后检测神经元凋亡、肿瘤蛋 白53(TP53)基因、白细胞介素6(IL-6)基因、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β 水平,并检测B 细胞淋 巴瘤/ 白血病2 蛋白(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。 结果 兴趣基因为TNF-α 和TP53,下游作用靶点多为Caspase、Bid 家族蛋白。高剂量Apg 组小鼠平台 穿梭次数为(4.42±0.76)次,目标象限停留时间为(33.5±6.1)s,较Model组[(1.80±0.41)次、(16.1±4.1)s] 显著增加(t=9.59、7.49,均P< 0.05),认知功能显著改善,选取高剂量组为Apg 组。后续实验表明,与 Model 组比较,Apg 干预可显著降低小鼠海马区TNF-α[(50.4±9.6)pg/ml 比(29.3±7.1)pg/ml,t=6.28,P< 0.01]、IL-1β[(60.4±13.6)pg/ml,比(28.7±7.1)pg/ml,t=6.56,P < 0.01]、IL-6 相对表达量[(3.4±0.5) 比(1.8±0.3),t=5.58,P < 0.01]和TP53[(4.4±0.9)比(2.3±0.4),t=6.18,P < 0.01]的表达;减少Bax [(2.74±0.60)比(1.60±0.30),t=5.18,P < 0.05]和Caspase-3[(3.14±0.60)比(1.80±0.40),t=5.58,P < 0.05]蛋白表达;增加Bcl-2 蛋白表达[(0.61±0.10)比(0.78±0.10),t=4.46,P< 0.05],并减少神经元凋亡 [(30.4±5.6)% 比(18.0±2.1)%,t=6.56,P<0.01]。结论 Apg可能通过抗炎(降低TNF-α、IL-1β、IL-6)、抗 凋亡(调节Bax/Bcl-2/Caspase-3)及调控TP53信号通路,对T2DM 引起的认知障碍具有保护作用。